lumafluor：Red Retrobeads™ IX (100 µl)

RetroBeads Gamma Lumafuor是Lumafuor公司的第一個(gè)反向示蹤產(chǎn)品，且被證明有效的產(chǎn)品。

該示蹤劑產(chǎn)品在體內(nèi)注射時(shí)濃度高，不易擴(kuò)散，信號(hào)強(qiáng)，對(duì)活細(xì)胞或活體無(wú)毒，存活時(shí)間超過(guò)一年。它與以下大多數(shù)示蹤劑、原位雜交檢測(cè)技術(shù)和免疫組織化學(xué)技術(shù)兼容

一些產(chǎn)品信息如下:

Red Retrobeads (100 µl)       Green Retrobeads IX (100 µl)       Red Retrobeads Gamma IX(100µl)

lumafuor高效逆向磁珠的操作說(shuō)明           

1、包裝和稀釋:       Lumafuor的珠子被包裝在一個(gè)密封的小瓶中，濃縮的珠子懸浮在蒸餾水中。如果使用紅色珠子作為神經(jīng)通路的反向示蹤，推薦使用稀釋法:在不降低珠子熒光標(biāo)記強(qiáng)度和質(zhì)量的情況下，可在大鼠視覺(jué)皮層中使用1:4稀釋。但是，對(duì)于第一個(gè)實(shí)驗(yàn)，我們不建議使用稀釋的珠子，而是使用原始溶液進(jìn)行注射示蹤。除蒸餾水外，常規(guī)鹽溶液如氯化鈉和KCl也可用作稀釋劑。如果使用綠珠，強(qiáng)烈建議使用未經(jīng)稀釋的原液。           

2、存儲(chǔ):       為了避免蒸發(fā)，珠溶液應(yīng)在4度冰箱中保存。不要冷凍它！冷凍豆將是無(wú)用和無(wú)法使用的。干燥后的珠子也不能使用（不能重新懸?。a(chǎn)品沒(méi)有明顯的使用壽命。如果按要求儲(chǔ)存，它可以?xún)?chǔ)存幾年。           

3、注射:       珠子最好使用壓力注射，如1ml Hamilton微量注射器或氣動(dòng)注射系統(tǒng)。如果需要小面積微量注射（30-50nl），可使用末端直徑為30-50um的玻璃電極進(jìn)行注射，而更大直徑的玻璃電極可用于常規(guī)反向示蹤（注射體積0.1-0.3ul）。然而，即使在較高的劑量下，珠子也不會(huì)從注射部位明顯擴(kuò)散（通常小于1 mm）。因此，為了盡可能完整地標(biāo)記投射到更大核的神經(jīng)元，需要多點(diǎn)注射。盡管磁珠帶負(fù)電荷，但不建議使用離子滲透法來(lái)示蹤磁珠。           

4、存活時(shí)間:       在大多數(shù)恒溫脊椎動(dòng)物系統(tǒng)中，檢測(cè)珠子的最短有效時(shí)間是24小時(shí)。在48小時(shí)內(nèi)，標(biāo)記強(qiáng)度隨注射時(shí)間增加，熒光強(qiáng)度在48小時(shí)后保持不變。在冷血?jiǎng)游镏校瑱z測(cè)珠子的建議時(shí)間是1周。目前還沒(méi)有檢測(cè)到珠子的最長(zhǎng)可檢測(cè)期。然而，珠子的熒光強(qiáng)度和質(zhì)量可以在體內(nèi)保持至少14個(gè)月不變，并且細(xì)胞可以被標(biāo)記。在動(dòng)物或神經(jīng)元中沒(méi)有發(fā)現(xiàn)珠子的毒性作用。           

5、固定和處理:       標(biāo)準(zhǔn)固定方法是:將0.1mpbs洗滌或灌注并固定在4%多聚甲醛中（0.1mpbs制劑，pH7.4）。用戊二醛固定會(huì)產(chǎn)生大量的組織自體熒光，這會(huì)阻礙用珠子標(biāo)記的神經(jīng)元。而且在戊二醛固定的組織中不會(huì)全觀察到綠珠，應(yīng)盡量避免。如果使用冰凍切片，應(yīng)使用PBS沖洗切片，并用明膠包被的載玻片干燥。風(fēng)干后，載玻片應(yīng)在二甲苯中保持透明1分鐘，然后用fluoromount或krystalon密封。

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